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品牌 | 紅榮微再 | 貨號 | MJ5460 |
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥/生物制藥,綜合 |
產品名稱:Inspire Spark® PrimeRNP Kit(基因編輯試劑盒)
貨號:MJ5460
規格:50 rxn
Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒,華雅思創現貨供應,歡迎咨詢
組分:
Solution I (eSpCas9):75μL(1.5 μL/rxn)
Solution II (buffer):2.5mL(50 μL/rxn)
儲存條件:
短期:解凍后-20℃(避免反復凍融)
長期:未開封-80℃;開封后長期不用需-80℃
有效期:18個月
核心技術與優勢
自遞送CRISPR/SpCas9系統:
無需電轉儀,直接原代細胞(如T細胞)和細胞系高效編輯。
敲除(KO)/敲入(KI)效率:85-90%
低脫靶率 + 無細胞毒性
實驗流程(以人原代T細胞為例)
一、轉導復合物制備
混合1.5μL SgRNA(100μM) + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分鐘(形成RNP)。
加50μL Solution II(室溫預平衡) → 混勻后室溫靜置5分鐘。
二、細胞轉導
細胞預處理:激活T細胞48小時后洗滌,離心去培養基(用OptiMEM/PBS清洗殘留)。
細胞沉淀重懸于轉導復合物 → 37℃孵育45分鐘。
三、培養與檢測
加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T細胞培養基 → 接種至24孔板(密度2-3×10?/mL)。
培養4-5天后檢測編輯效率。
關鍵注意事項
應用場景 操作要點
AAV輔助KI AAV體積≤5μL:RNP制備階段加入;>5μL:細胞培養階段加入(MOI: 2×10?-5×10?)
多基因編輯 方案A:混合多靶點RNP;方案B:分步轉導(間隔48小時,≤2基因/次)
細胞狀態 轉導前活性>90%
電轉兼容性 Solution I(eSpCas9)可單獨用于電轉 → 效率較野生型提升30%
產品名稱:Inspire Spark® PrimeRNP Kit(基因編輯試劑盒)
貨號:MJ5460
規格:50 rxn
Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒,華雅思創現貨供應,歡迎咨詢